鲎试剂与新型重组级联试剂（rCR）对细菌内毒素检测结果的比较研究

Sievers分析仪与知名药企礼来公司合作，在美国注射药物协会（PDA）药物微生物学会议上展示了用于细菌内毒素检测（BET，Bacterial Endotoxin Test）的重组试剂和微流控技术的研究。

该研究结果来自于真实世界的样本数据，证明了重组试剂在现代微生物检测平台上的准确性和可靠性。礼来公司全 球质量实验室高级总监Jay Bolden和Sievers分析仪生命科学产品应用专家Hayden Skalski在PDA微生物学会议上展示了研究成果。

图为Jay Bolden与Hayden Skalski

在PDA微生物学会议

背景：鲎试剂（LAL）与微流控细菌内毒素检测中的重组级联试剂（rCR）

越来越多的制药公司通过采用创新技术来满足不断变化的监管要求，同时构建更加可持续的运营模式。内毒素检测正是这一转变的典型代表，因为监管压力和可持续发展需求正在重塑细菌内毒素检测仪领域的格局。欧盟GMP附录一鼓励通过技术进步来简化生产流程，而美国药典（USP）<86>最近发布的内毒素检测重组试剂则为实现监管合规性和可持续发展目标提供了重要机会。

出于这些原因，Sievers分析仪与礼来公司合作，使用Sievers® Eclipse细菌内毒素检测仪，对传统鲎试剂（LAL）和新型重组级联试剂（rCR）的检测结果进行比较研究。该仪器利用微流控技术与向心力，将传统96孔板的检测准备时间缩短至原来的85%；减少高达90%的鲎试剂或重组试剂的用量；并实现试剂的自动化加样。除提升效率外，该系统还能确保检测结果的精确性与可靠性，帮助生产商同时满足《附录一》规范要求和可持续发展目标，在完全符合法规要求的前提下保障患者安全。

本研究使用从真实世界样品中获得的数据概述了内毒素检测的结果，提供了两种试剂类型之间的实际比较。

比较研究：检测天然内毒素（NOE）和内毒素参考标准品（RSE）

这项研究有两个目标。首要目标是评估天然内毒素（NOE）和添加了内毒素参考标准品（RSE）的纯化水的检测和回收率。此评估采用了两种不同的检测方法：传统鲎试剂（LAL）和重组级联试剂（rCR），目的是证明两种检测方法均能实现可靠的内毒素回收。

另一个目标是通过在Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪上使用两类试剂进行挑战性测试，以验证这些性能指标。这一验证尤为关键，其目的不仅在于证明该系统适用于实际样品检测，同时还能带来两大显著优势：试剂消耗量降低90%和可使用重组试剂，从而推动行业践行更可持续的检测方案。

样品：12种样本类型的rCR比较研究

在鲎试剂（LAL）和重组级联试剂（rCR）的比较研究中使用了以下样品：

 两种单克隆抗体

 胰岛素

 肽

 NOE（见图1）

 组氨酸和醋酸钠

 LRW

 纯化水

 含RSE加标的纯化水

 聚山梨醇酯80

 类生物产品

 组件（塞子、试剂盒）

 酵母提取物

图1：天然内毒素（NOE）的比较

结果：LAL与rCR对比 - 性能和测试结果

下图详细说明了样品和试剂的阳性产品对照（PPC）回收率。

图2：样品和试剂的回收率比较

结论：rCR在微流控平台中的性能

这项研究表明，使用Sievers Eclipse检测真实样品中的细菌内毒素和天然内毒素时，LAL和rCR的性能相当。根据现有证据可确认：在已验证样本兼容性的前提下，Sievers Eclipse细菌内毒素检测仪能够成功应用重组级联试剂进行检测。

通过Eclipse的向心微流控平台实现的自动化，提供了当前最为简便的细菌内毒素检测微流控解决方案，可显著节省时间并减少出错可能。这项创新技术的应用使细菌内毒素检测流程得以优化，同时完全符合药典标准。

优势包括：

 符合美国药典USP <85>和<86>、中国药典ChP <1143>要求

 经验证可与鲎试剂和重组级联试剂rCR兼容

 减少高达90%的所需试剂量；助力可持续发展计划

 27次移液步骤可处理21个样本，效率更高

 符合欧盟GMP附录一准则的创新技术